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    技术支持

    致力于引进国外先进技术,为广大科研工作者和医疗机构提供高质量 的科研技术支持 。

    样品制备指南

    sanger测序样品

    样品制备指南


    DNA类型

    DNA长度(包括长度)

    模板浓度

    模板总量

    质粒

     < 6 kb

    ~50 ng/uL

    ~500 ng

     6 kb~10 kb

    ~80 ng/uL

    ~800 ng

     10 kb

    ~100 ng/uL

    ~1000 ng

    已纯化PCR产物

    <500 bp

    ~1 ng/uL


    未纯化PCR产物

    原液总体积不少于20uL

    菌液

    直接提取:2-4 mL已过夜培养的菌液

    需扩大培养:>200 uL新鲜菌液

    菌板

    提供菌板注意菌落不能太过密集,标记需挑取的菌落

    测序引物

    ≥5 pmol/uL(5uM)

    ≥10 ul



    备注:

    提供菌液,请注明抗生素类型,常备抗生素:氨苄青霉素(Amp),卡那霉素(Kan),氯霉素(Chl)等等,若需接非常用抗生素,如博来霉素,建议提供样品时能一并提供相应抗生素。   

    PCR产物,如果片段小于100bp,建议克隆后测序;注明条带大小,条带是否单一   ;

    测序引物长度尽量控制在20-30bp,引物过短或过长均会影响测序质量  ;

    提供的DNA样品用去离子水或者双蒸水溶解,不用TE缓冲液溶解。




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